液相色譜柱作為高效液相色譜分析的核心部件，其養(yǎng)護(hù)直接關(guān)系到分離效果、數(shù)據(jù)準(zhǔn)確性及使用壽命。以下是從使用規(guī)范、清潔維護(hù)、存儲(chǔ)管理到預(yù)防性維護(hù)的全方面養(yǎng)護(hù)細(xì)節(jié)：

　　一、日常使用規(guī)范

　　- 流動(dòng)相選擇與預(yù)處理

　　- 純度要求：必須使用HPLC級(jí)溶劑，避免雜質(zhì)沉積堵塞柱頭。

　　- pH控制：反相柱適用pH 2-8范圍，超出可能導(dǎo)致硅膠骨架溶解；對(duì)于特殊pH條件,應(yīng)選用雜化顆粒柱。

　　- 緩沖鹽濃度：常用磷酸鹽緩沖液濃度不超過50mmol/L，高離子強(qiáng)度易析出結(jié)晶損傷填料，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需用純水過渡至少30分鐘。

　　- 樣品預(yù)處理與進(jìn)樣

　　- 清潔進(jìn)樣：樣品需經(jīng)0.22μm濾膜過濾或高速離心去除顆粒物，避免堵塞柱頭。

　　- 溶解介質(zhì)：優(yōu)先用流動(dòng)相溶解樣品，減少溶劑極性差異對(duì)填料的沖擊。

　　- 系統(tǒng)平衡與壓力監(jiān)測(cè)

　　- 梯度洗脫預(yù)平衡：新柱或長(zhǎng)時(shí)間未用的色譜柱,需用初始比例流動(dòng)相以低流速(0.2mL/min)沖洗2小時(shí)以上,使固定相充分潤(rùn)濕。

　　- 壓力異常處理：正常壓力波動(dòng)應(yīng)在±5%范圍內(nèi),若出現(xiàn)突升超過30%,提示篩板堵塞或填料塌陷,需立即停機(jī)檢查。

　　二、深度清潔與再生技術(shù)

　　- 常規(guī)沖洗與正向沖洗

　　- 斷開檢測(cè)器連接,改用異丙醇:水=1:1混合液,以1mL/min流速反向沖洗30分鐘,隨后切換至純有機(jī)相運(yùn)行1小時(shí)，此法可清除90%以上的極性污染物。

　　- 蛋白質(zhì)殘留推薦使用含0.1%TFA的6M尿素溶液沖洗;脂類物質(zhì)采用正己烷:異丙醇=1:1體系超聲處理15分鐘。

　　- 原位再生與特殊清洗

　　- 酸堿交替法：針對(duì)頑固吸附物,依次注入0.1mol/L NaOH→0.1mol/L HCl→水洗各20mL,注意每次切換后需用中性流動(dòng)相過渡，適用于聚合物基質(zhì)柱。

　　- 超臨界流體清洗：CO?流體在40℃、300bar條件下可有效去除非極性雜質(zhì),尤其適合半制備型大孔徑柱(≥100Å)。

　　三、存儲(chǔ)與運(yùn)輸管理

　　- 短期存放(1個(gè)月)

　　- 惰性氣體保護(hù)：充入氮?dú)庵脫Q內(nèi)部氧氣,抑制微生物滋生，可將色譜柱置于含有干燥劑的密封容器內(nèi)。

　　- 溫度控制：最佳存儲(chǔ)溫度為15-25℃,避免陽光直射，低溫環(huán)境(4℃)下需提前恢復(fù)至室溫后再啟用。

　　- 長(zhǎng)期保存

　　- 反相柱存于純甲醇或乙腈中，正相柱存于脫水正己烷中，離子交換柱存于含防腐劑的水中，擰緊堵頭避光保存。

　　四、預(yù)防性維護(hù)策略

　　- 定期性能監(jiān)測(cè)

　　- 每季度進(jìn)行苯甲酸鈉標(biāo)品測(cè)試，當(dāng)理論塔板數(shù)下降至初始值70%時(shí)判定壽命終結(jié)。

　　- 記錄使用次數(shù)、壓力變化及維修歷史，建立維護(hù)日志。